α-半乳糖苷酶广泛存在于植物、微生物及动物中，属于糖苷水解酶第26和37家族。其中，第26家族的α-半乳糖苷酶只来源于真核生物，而第37家族的α-半乳糖苷酶则主要来源于原核生物。根据酶活和最适pH，α-半乳糖苷酶有酸性和碱性之分。对于植物来源的α-半乳糖苷酶的研究比较多，在植物种子、果实、叶子和块茎中都发现了该酶，且来源于种子和叶子的多是酸性α-半乳糖苷酶，属于糖苷水解酶第27家族。
α-半乳糖苷酶可用于改善和消除饲料及豆制食品中的抗营养成分。此外，它在医学领域中能实现B→O血型转变、制备通用型血，以及在法布里病的酶替代治疗中也发挥了重要作用。α-半乳糖苷酶还可作用于含α-半乳糖苷键的复合多糖、糖蛋白和鞘糖。某些α-半乳糖苷酶在底物浓度高度富集的情况下还具有转半乳糖基作用，利用这一特点可用于低聚糖的合成及制备环糊精衍生物。
α-半乳糖苷酶的催化作用是移除底物末端α-连接的非还原性D-半乳糖，或通过转糖基作用将半乳糖基团以α-1,6糖苷键转移到受体C6位的羟基上。含有这一类糖苷键的底物和受体在自然界中分布广泛，因此，α-半乳糖苷酶在工业、食品、医疗和科学研究中有着广泛的应用，被认为是最有应用潜力的酶制剂之一。
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